Pralesnička harlekýn se vyskytuje ve Venezuele, v Severovýchodní Brazílii a Guyaně. Vyhledává teplé, vlhké, zalesněné, nížinné oblasti mezi 50 a 800 m n.m., kde žije v listí, pod kameny a padlými kmeny v blízkosti řek a potoků. Samička snáší až 12 vajíček, pulci se líhnou asi za dva týdny. O vajíčka se stará sameček, otáčí je, aby měla dostatek kyslíku a pak je přenáší do malých vodních nádržek. K proměně v žabky dochází za 65 - 85 dnů. Má vysoce toxický sekret vylučovaný kůží, který ji chrání před plísněmi, bakteriemi i před predátory. Pralesničky harlekýn se dožívá více než 10 let.